K-RAS热点突变检测试剂盒-自主发布-资讯-生物在线

K-RAS热点突变检测试剂盒

作者:苏州工业园区为真生物医药科技有限公司 2009-11-06T00:00 (访问量:4603)

K-RAS热点突变检测试剂盒

1、检测意义

临床上靶向新药爱必妥(Erbitux,西妥昔单抗)和帕尼单抗(Panitumumab)仅适用于无突变的K-RAS基因野生型患者,对K-RAS突变患者无效。美国国立综合癌症网络(NCCN)将K-RAS检测列为《结肠癌临床治疗指南》。

本试剂盒主要用于高灵敏度、高通量、低成本检测K-RAS突变,协助临床医生筛选爱必妥、帕尼单抗的有效患者,实现肿瘤病人的个体化治疗,降低治疗风险以及患者负担。

2、技术方法

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本试剂盒采用新型突变研究技术——高分辨率熔点曲线分析(High Resolution Melting AnalysisHRM),无需序列特异性探针,无需测序,也不受突变碱基位点与类型的局限,应用Roche LlightCyclerTM 480荧光定量PCR仪器分析,即可完成对样品基因型的判断。

3、检测样品

n 石蜡包埋组织或切片

n 血浆、血清等非细胞体系的游离DNA

n 组织标本包括新鲜、液氮冻存、酒精固定和RNAlater保存的各种手术样本;

n 穿刺活检的各种方式保存的样本;

n 各种体液样本包括胸腹水、痰液、血液中细胞DNA检测;

4、适用范围

结肠癌、胃癌、头颈癌、非小细胞肺癌患者,用于爱必妥或帕尼单抗等靶向药物的适用人群筛选。

5、新功能

非侵入性检测K-ras在血清游离DNA中的突变情况,从而可实现动态检测肿瘤变化,评价病人对靶向药物的治疗反应。

结肠癌、胰腺癌组织中多有K-ras突变,由于HRM技术实现了血清或血浆检测突变,因此检测血液或粪便中K-ras突变也可适用于这些癌症的早期筛查(Gastroenterology. 2009;136(2):459-70

6技术特点

n 高通量1次可检测10-300个样本,国内首次实现高通量检测。

n 高敏度HRM检测灵敏度能达到1%-0.1%,是传统“PCR+测序”方法的25-250倍。

n 特异性好PCR产物无需后续处理,特异性达100%

n 重复性好:实验闭管进行,避免交叉污染。

n 精确度高:精确获得K-RAS基因多个位点状况,包括已知的7个热点突变(第12编码子核苷酸突变,第13编码子核苷酸突变和第61编码子核苷酸突变),也可同时侦测未知突变。

n 适用范围广:可用于新鲜或酒精固定、石蜡包埋的手术标本,也可用于微量的穿刺或活检标本、血液标本、粪便标本等非手术标本的检测。而传统“PCR+测序”方法对大部分不能手术的患者难以检测。

7、试剂盒规格

产品编号

产品名称

规格

价格

WZ-K12

K-RAS热点突变检测试剂盒HRM

12人份

询价

WZ-K24

K-RAS基因突变检测试剂盒HRM

24人份

询价

WZ-K48

K-RAS基因突变检测试剂盒HRM

48人份

询价

试剂盒组成:含引物、Mg2+Hotstar-Taq酶和荧光探针混合液的试管(1管),阴性对照(1管),阳性对照(1管),去离子水(1管)。检测外显子2的密码子1213,占所有突变的98%。说明书一份。

8、参考文献

n Zou H, Taylor WR, Harrington JJ, et al. High detection rates of colorectal neoplasia by stool DNA testing with a novel digital melt curve assay. Gastroenterology. 2009;136(2):459-70.

n Kramer D, Thunnissen FB, Gallegos-Ruiz MI, Smit EF, Postmus PE, Meijer CJ, Snijders PJ, Heideman DA. A fast, sensitive and accurate high resolution melting (HRM) technology-based assay to screen for common K-ras mutations. Cell Oncol. 2009;31(3):161-7

n Simi L, Pratesi N, Vignoli M, Sestini R, Cianchi F, Valanzano R, Nobili S, Mini E, Pazzagli M, Orlando C. High-resolution melting analysis for rapid detection of KRAS, BRAF, and PIK3CA gene mutations in colorectal cancer. Am J Clin Pathol. 2008;130(2):247-53.

n Do H, Krypuy M, Mitchell PL, Fox SB, Dobrovic A. High resolution melting analysis for rapid and sensitive EGFR and KRAS mutation detection in formalin fixed paraffin embedded biopsies. BMC Cancer. 2008;8:142.

n Krypuy M, Newnham GM, Thomas DM, Conron M, Dobrovic A. High resolution melting analysis for the rapid and sensitive detection of mutations in clinical samples: KRAS codon 12 and 13 mutations in non-small cell lung cancer. BMC Cancer. 2006; 21;6:295.

n Crook S, Seth R, Jackson D, Ilyas M. Concomitant mutations and splice variants in K-RAS and BRAF demonstrate complex perturbation of the Ras/Raf signalling pathway in Colorectal Cancer. Gut. 2009; 26.

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