核酸电泳是分子生物学研究中的一项基本技术，广泛应用于基因克隆、DNA指纹分析、RNA表达研究等领域。这项技术的核心在于利用电场驱动DNA或RNA分子通过凝胶基质，实现不同大小分子的分离。尽管核酸电泳的原理相对简单，但其往往影响最终的成果展示。所以在实际操作过程中，如何提高电泳效率、获得更清晰的条带一直是研究人员追求的目标。小翌将分享一些实用的实验室小窍门，以帮助各位科研小伙伴们提高电泳效率~

小窍门1 

选择合适的凝胶浓度和电泳缓冲液

凝胶浓度对电泳分离效率有着直接影响。琼脂糖是最常用的凝胶材料，其浓度通常在0.7%至2%之间选择。浓度越高，凝胶的分子孔径越小，DNA迁移速率越慢，但分辨率越高。反之，浓度越低，DNA迁移速率越快，但分辨率较低。电泳缓冲液的组成对DNA的迁移速度和分离效率同样重要。因此，针对实验目的不同，选择合适的凝胶浓度与适配的电泳缓冲液。

TAE缓冲液

TAE缓冲液含有乙酸（Acetic acid）、EDTA和Tris，适合用于快速电泳和大片段DNA的分离。乙酸的存在降低了凝胶的pH值，有助于提高电泳速度。

TBE缓冲液

TBE缓冲液含有硼酸（Boric acid）、EDTA和Tris，其离子强度较高，适合用于小片段DNA的高分辨率分离。硼酸根离子的存在增强了凝胶的稳定性，有助于提高分离效率。因此凝胶浓度越大，需采用TEB缓冲液，便于分离条带。

小翌有多种琼脂糖，适合不同的应用场景，供大家选择~

小窍门2 

样品准备

DNA纯化

确保DNA样品的纯度，避免蛋白质、多糖和其它杂质的污染，这可以通过适当的纯化步骤实现。纯化的DNA样品能够提供清晰的电泳条带，减少背景干扰。

DNA Marker

选择背景干净、带型稳定、大小精准的DNA Marker，如翌圣GoldBand系列DNA Marker（Cat#10501ES-10518ES）。

小窍门3 

均匀加样

加样技巧

使用加样器时保持平稳，右手执移液枪，左手扶在移液枪前方细柄处，斜角45℃悬空插入点样孔中2-3 mm处点样。尽量避免戳破凝胶，避免样品接触凝胶表面，减少样品扩散。均匀的加样能够确保DNA片段在凝胶中的一致迁移，避免条带扭曲或模糊。

加样量

控制适当的加样量，过量的样品会导致条带模糊。适量的加样能够保证条带的清晰度和可读性，其上样量与核酸电泳制胶时的梳子大小相关。

小窍门4 

电泳条件

电压控制

根据凝胶长度和厚度调整电压，过高的电压会导致热量积累，影响DNA的迁移。适宜的电压设置有助于保持恒定的电泳速度，避免条带扭曲。

恒压电泳

优先选择恒压电泳而非恒流电泳，以保持电场强度的稳定。恒压电泳能够减少电泳过程中的热效应，提高分离效率。但需注意电压控制在110-130v为佳，过高电压易造成不稳定脉冲，影响电泳效果。

小窍门5 

预电泳

如果是新鲜配制的缓冲液，在加样前进行预电泳，可以清除凝胶中的杂质和气泡，平衡凝胶孔隙中的离子浓度，减少样品迁移过程中的阻力，提高电泳效率。预电泳时间一般建议5-10分钟。

小窍门6 

使用新鲜凝胶

避免重复使用

重复使用的凝胶可能会因缓冲液的渗入而改变孔隙大小，影响分离效果。新鲜凝胶能够提供一致的孔隙率，保证电泳结果的可重复性。

小窍门7 

核酸染料的选择

安全染料

使用YeaRed（Cat#10202ES）或YeaGreen（Cat#10204ES）无毒核酸染料，避免使用EB等有毒染料，减少紫外光暴露风险。安全染料不仅对操作人员更安全，而且对环境的影响更小。

小翌希望通过上述小窍门的实施，可以帮助大家显著提高核酸电泳的分离效率和结果的清晰度，进一步提高实验的效率和安全性~

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