? 同型对照是什么？ A 同型对照 (Isotype control) 是一种与一抗保持相似特性但缺乏特异性靶标的抗体。在流式实验中，同型对照作为阴性对照，可以区分特定抗体信号与非特异性背景染色，能够排除干扰因素以确保实验结果的准确性。同型对照还可以用于设定流式细胞仪的电压，并有效节约实验成本。
? 产生背景染色的原因？ A 图1. HepG2 和 A549 细胞通过使用抗体 Caspase-3 (bs-0081R-FITC) 进行流式细胞检测，蓝色为空白对照，黄色为同型对照，绿色为特异性一抗。流式实验中根据同型对照设置阴性阈值。
? 什么情况下应使用同型对照？ A 同型对照也不是适用于所有情况。同型对照仅能检测不由表位引起的非特异性结合，而相似表位不同抗原，或不同表位相同抗原产生的交叉反应就不能被同型对照检测。在以下情况中，实验人员应使用同型对照以确保流式实验的准确性：
? 如何选择同型对照？ A 在实验中选择的同型对照需要与一抗的特性相匹配。合适的同种型对照应与一抗的宿主种族、Ig亚型、偶联物、轻链和工作浓度相同。在流式实验中，选择合适的同型对照可以有效排除干扰因素，实现更精确的数据分析。而选用 PBS 作为空白对照则达不到同样的效果，甚至可能误导试验结果。
流式检测中的常用同型对照 抗体名称 标记荧光素 货号 Mouse IgG1 FITC PE PerCP Mouse IgG2a FITC PE PerCP Mouse IgG2b FITC PE PerCP Mouse IgG FITC PE APC AF488 AF594 AF647 CY3 CY5 Rat IgG FITC PE APC AF488 AF594 AF647 CY3 CY5 Rat IgG FITC PE APC AF488 AF594 AF647 地 址： 北京市通州区马驹桥镇联东U谷西区四期67号楼 联系人： 秦 电 话： 4009019800 传 真： 010-58129612 Email：sales@bioss.com.cn
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